HPLC酸洗鈍化！

HPLC系統(tǒng)中可能的污染物來自人類的觸摸，暴露在實驗室化學(xué)環(huán)境中，與零件相關(guān)的殘留物，或來自以前流動相和樣品的殘留物。HPLC系統(tǒng)本身會逐漸被流動相清洗，但一些釋放的雜質(zhì)會吸附在色譜柱和探測器潤濕表面，從而降低總性能。

?磷酸清洗：通常用于從系統(tǒng)中去除有機(jī)雜質(zhì)?？赡苁且驗橄礈欤坪醣葟?qiáng)有機(jī)溶劑更好更快。這一步必須在硝酸鈍化前清洗。

?硝酸鈍化：實際上作用于不銹鋼表面，在表面產(chǎn)生均勻的氧化層。該氧化膜保護(hù)不銹鋼免受腐蝕（鹵化物、螯合劑等），并盡量減少浸出的金屬離子進(jìn)入流動相。

使用前應(yīng)用磷酸清洗和硝酸鈍化，包括：

?所有氨基酸分析系統(tǒng)；

?所有包含電化學(xué)檢測器的系統(tǒng)；

?所有分析無機(jī)陽離子的系統(tǒng)，包括過渡金屬；

?所有使用柱后添加衍生試劑或復(fù)合樣品成分的系統(tǒng)。

使用前只需進(jìn)行磷酸清洗，包括：

?所有常規(guī)用途.可能在低pH在低紫外波長的環(huán)境下運(yùn)行HPLC系統(tǒng)；

?所有需要高靈敏度性能的梯度紫外線檢測系統(tǒng)。

一準(zhǔn)備工作

首先，取下色譜柱，用兩個連接器或接頭代替色譜柱。實施此清洗步驟時，可選擇監(jiān)測的紫外波長為：254nm。紫外線檢測器的自動回零功能通過軟件或移動電纜取消。

二具體步驟

1.用甲醇徹底沖洗系統(tǒng)，以等比例的方式通過泵的所有管道。

2.用水徹底沖洗系統(tǒng)，以等比例的方式通過泵的所有管道。

3.通過泵的所有管道以等比例導(dǎo)入~30%v/v磷酸水溶液mL/min流洗流速約一小時。沖洗過程中移動所有閥門，包括：參考閥.進(jìn)樣閥、旁路閥等。

4.用水徹底沖洗所有管道和系統(tǒng)。

必要時用6N硝酸(HN03)重復(fù)上述步驟。否則，跳到第7步。注：硝酸鹽是一種強(qiáng)紫外線吸收溶液。除非需要，不要做鈍化程序。

5.通過泵的所有管道以等比例導(dǎo)人6N硝酸水溶液(約40%)。mL/min流速洗約一小時。

6.用水徹底沖洗系統(tǒng)，仔細(xì)檢查是否有泄漏，在沖洗過程中反復(fù)移動所有閥門，包括：參考閥.進(jìn)樣閥、旁路閥等。

注：如果您想使用不到2700nm為了檢測紫外波長，需要更多的水清洗過程，不斷更換新鮮水，移動每個閥門（沖洗進(jìn)樣器等）。以去除系統(tǒng)中所有的痕量硝酸鹽離子。硝酸鹽經(jīng)常在幾天內(nèi)觀察到低紫外波長下的負(fù)基線漂移。經(jīng)常換水和耐心是盡快消除紫外線背景的關(guān)鍵。

7.返回甲醇洗滌，繼續(xù)用實驗所需的溶劑沖洗。

8.通過軟件或連接電纜恢復(fù)紫外線檢測器的自動回零功能。